細(xì)說上海分光光度計(jì)的基本原理及使用方法步驟
發(fā)布時(shí)間:
2021-03-23 00:00
上海分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。該儀器是實(shí)驗(yàn)室、科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)療、農(nóng)業(yè)、食品廠、飲用水廠等機(jī)構(gòu)必備檢驗(yàn)設(shè)備。已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。
分光光度計(jì)基本原理是指采用一個(gè)可以產(chǎn)生多個(gè)波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計(jì)算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時(shí),被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關(guān)系如下式:A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :
A:為吸光度;
I。:為入射的單色光強(qiáng)度;
I:為透射的單色光強(qiáng)度;
T:為物質(zhì)的透射率;
k:為摩爾吸收系數(shù);
L:為被分析物質(zhì)的光程,即比色皿的邊長;
c:為物質(zhì)的濃度。
分光光度計(jì)的使用方法步驟:
1、把分光光度計(jì)電源線連接好,最好使儀器的電源具備接地功能;
2、接通電源后,按動(dòng)開機(jī)開關(guān),然后讓儀器預(yù)熱至少20分鐘,儀器會(huì)自動(dòng)校正,然后顯示546.0nm 0.000A說明自檢結(jié)束,就可以開始測試;
3、使用“方式”鍵測試的方式,再根據(jù)自己要測量的結(jié)果選透光率、吸光度、和濃度的測試;
4、要對(duì)波長進(jìn)行分析,選擇按鍵6,然后按提示依次進(jìn)行;
5、把樣品溶液和要測定的溶液各自倒入比色皿中后,然后打開樣品蓋,把盛著溶液的比色皿插入另一個(gè)比色皿中,最后蓋好樣品蓋;
6、把參比的溶液拉到光路中按住“OABS/100%T”鍵,這時(shí)的顯示器會(huì)顯示出BLANKING,,直到最后顯示出“100%T”或者是“0.000A”為止;
7、最后儀器顯示出“100%T”或者是“0.000A”即可結(jié)束測試。這時(shí)被測樣品的透光度、吸光度等參數(shù)就可直接讀出;
8、分光光度計(jì)使用完畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。
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